Gan fod cyffuriau peptid protein yn sylweddau bioactif yn bennaf

Gan fod cyffuriau peptid protein yn sylweddau bioactif yn bennaf, ac mae gweithgaredd biolegol nid yn unig yn dibynnu ar strwythur sylfaenol y cyffur, ond hefyd yn perthyn yn agos i'r strwythurau eilaidd a thrydyddol, mae bioassay yn ddull unigryw ac angenrheidiol i astudio ffarmacocineteg y dosbarth hwn. Mae dau ddiben i fio-brofion, sef pennu crynodiadau cyffuriau yn hylifau'r corff yn uniongyrchol a nodi gweithgaredd biolegol cyffuriau wedi'u labelu. Gellir rhannu ei ddulliau yn ddau brif gategori.
1.1.1 Dadansoddiad in vivo Dull glwcos gwaed confensiynol llygoden gydag inswlin, ac ati, yn ogystal â gwahanol ddulliau a sefydlwyd yn unol â gweithgaredd biolegol gwahanol fathau o polypeptidau protein, megis IL-8 mobileiddio neutrophils mewn arbrofion cwningen a sefydlwyd yn ôl i natur IL-8 yn gallu symud nifer fawr o niwtroffiliau o asgwrn [1]. Mae'r math hwn o ddull yn adlewyrchu gweithgaredd biolegol yn fwyaf greddfol, ond mae'n cynnwys yr anifail cyfan, mae'n cymryd llawer o amser ac yn llafurus, mae ganddo sensitifrwydd isel, ac mae ganddo amrywiad mawr.
1.1.2 Mae dadansoddiad meinwe (cell) in vivo fel NGF yn ysgogi twf ganglia gwreiddiau dorsal cyw iâr, ocsitosin mewn dull crothol ex vivo llygod mawr, ac ati. Gyda datblygiad bioleg moleciwlaidd, mae llawer o linellau celloedd dibynnol penodol a sensitif wedi'u sefydlu, ac mae diwylliant celloedd wedi dod yn ddull mwyaf cyffredin. Yn ôl y gwahanol fecanweithiau o ryngweithio peptid protein â chelloedd, mae yna lawer o weithrediadau penodol. Megis profion amlhau, sy'n gyflym ac yn sensitif, ond ychydig yn llai penodol; Antiproliferation fel ays, y system ganfod yn syml, sensitif a phenodol; Mae profion lleihau effaith cytopathig [2], yn seiliedig ar gyffuriau â gweithgaredd gwrthfeirysol fel interfferon, yn amddiffyn celloedd rhag difrod firaol, mae'r dull yn reddfol ac yn sensitif, ond efallai y bydd isdeipiau peptid yn ymyrryd â nhw. Mae'r dulliau uchod yn seiliedig ar gynnydd a gostyngiad yn nifer y celloedd fel dangosyddion meintiol ac effeithiol, ac mae'r dulliau cyfrif yn cynnwys dull cyfrif uniongyrchol a dull cyfrif anuniongyrchol, mae'r olaf yn cynnwys dull MTT, dull ymgorffori isotop (3H, 14C), ac ati. Yn ogystal, mae yna brofion yn seiliedig ar ryngweithio anuniongyrchol polypeptidau gwyn wy â chelloedd, megis dull sefydlu gwrthgyrff wedi'i gyfuno â immunodetection [3], dull dadelfennu a achosir gan ensymau ynghyd ag adwaith ensymau [4] ac yn y blaen. Yn gyffredinol, mae gan ddulliau diwylliant celloedd fanteision sensitifrwydd a phenodoldeb, gwrthrychedd a dibynadwyedd, ond mae eu diffygion hefyd yn amlwg. Yn gyntaf, ni all biobrofion fesur metabolion bach anactif ac olrhain eu dynameg in vivo; Yn ail, mae'r samplau'n bodoli'n bennaf mewn serwm dynol neu anifail, ac mae ymyrraeth sylweddau mewndarddol mewn serwm a thraws-adwaith ffactorau mewndarddol posibl yn effeithio ar benodolrwydd y dull. Ar ben hynny, mae angen cytocinau trothwy yn aml i gychwyn prosesau biolegol, sy'n lleihau sensitifrwydd y dull; Mae diwylliant hirdymor o gelloedd straen dibynnol yn dueddol o dreiglo sy'n effeithio ar benodolrwydd y assay.